摘要：优化嘌呤霉素筛选浓度 背景 嘌呤霉素（Puromycin）是一种广泛应用于体外和体内系统中选择筛选转染细胞的抗生素。使用Puromycin选择的转染细胞常用于基因操作、表达谱
优化嘌呤霉素筛选浓度
背景
嘌呤霉素（Puromycin）是一种广泛应用于体外和体内系统中选择筛选转染细胞的抗生素。使用Puromycin选择的转染细胞常用于基因操作、表达谱、蛋白质组学等研究中。Puromycin的作用机制是抑制细胞的蛋白质合成，通过与核糖体上的tRNA结合来破坏多肽链的扩展。然而，Puromycin具有副作用，它不仅抑制转染细胞的蛋白质合成，还可以导致转染细胞凋亡。因此，选择适当的Puromycin浓度筛选转染细胞非常重要。
方法
在本研究中，我们将选定的细胞系分为不同组，每组分别使用不同浓度的Puromycin进行筛选，选出适宜的浓度用于后续实验。实验所用细胞系是HEK293和HCT116，两个细胞系分别来自人的肝脏和结肠。实验过程中，我们使用Puromycin在不同时间段内进行细胞生长检测，包括细胞存活率、细胞凋亡率、基因表达以及蛋白表达情况。根据测量结果，观察Puromycin对细胞生长影响的变化，数据经过统计学分析进行比对。
结论
经过本次实验，我们发现Puromycin对细胞生长的影响与浓度和时间有关。在HEK293细胞系中，合适的浓度范围在2-10μg/mL之间，时间范围在48-72小时内；而在HCT116细胞系中，合适的浓度范围在1-6μg/mL之间，时间范围为72-96小时。在细胞实验中，我们应该根据实验目的和所用细胞系选择合适的Puromycin浓度，以便筛选转染细胞并获得所需的结果。版权声明：本站部分常识内容收集于其他平台，若您有更好的常识内容想分享可以联系我们哦！
